Foliculogênese em primatas neotropicais (Aotus nancymaae e Sapajus macrocephalus: quantificação folicular e imunolocalização das proteínas Caspase-3, BCL-2, PCNA e AMH.

Abstract

Este trabalho objetiva contribuir para o conhecimento da biologia reprodutiva de fêmeas de primatas não humanos (PNH). Para tanto, foi realizada pesquisa sobre a morfofisiologia ovariana, identificando a localização in situ de componentes celulares envolvidos no processo de apoptose, anti-apoptose e proliferação folicular, além da expressão do hormônio anti-Mülleriano (AMH). Para tanto, foram coletados ovários de seis fêmeas de Aotus nancymaae criadas em ambiente de cativeiro, e de seis fêmeas de Sapajus macrocephalus, de vida livre, nas três fases reprodutivas (luteal, folicular e gestante). Os animais eram pertencentes à comunidade Nova Esperança localizado em Iquitos, na Amazônia peruana. As amostras foram conservadas em formol, e posteriormente em álcool 70%; submetidas ao processamento histológico, e cortes de 5µm de espessura foram corados em Hematoxilina-Eosina. Em seguida foram realizadas as etapas de aplicações da imunohistoquímica para Caspase-3, Bcl-2, PCNA e AMH. Foi utilizado o programa BioEstat 5.0, para análise de variância da quantificação histológica folicular (Kruskal-Wallis) e da quantificação das células imunorreativas para Caspase-3, Bcl-2, PCNA e AMH (Kruskal-Wallis e Dunn). A associação entre as imunorreações apoptóticas, anti-apoptóticos, prolifarativas e hormonais foi determinada pela Análise das Coordenadas Principais (PCoA) do software R. Em A. nancymaae houve diferença significativa na quantificação entre os folículos primordiais e secundários, primordiais e de Graaf, e primários e de Graaf (Kruskal-Wallis, p<0,05), nas três fases reprodutivas. Os marcadores proteicos e hormonais variaram significativamente entre os tipos celulares (Pseudo F=14.486 p=0.001). Foi observada imunorreação para Caspase-3-ativada no estroma e células foliculares de folículos primários, folículos secundários, folículo de Graaf (células da granulosa, oócitos, células tecais), além do corpo lúteo, nas três fases reprodutivas. Foi observada ainda imunorreação para Bcl-2 em células da granulosa e oócitos de folículos pré-antrais e antrais; e imunorreação para PCNA em núcleos e citoplasmas de oócitos de folículos primordiais e primários, nas gônadas de fêmeas no estágio luteal, em folículos primordiais em fêmeas gestantes e em folículos primordiais normais e atrésicos de fêmeas no estágio folicular; e ainda, imunorreação para o AMH nas células da granulosa e oócitos de folículos antrais em maturação. Assim, as técnicas de imunomarcação para as proteínas Caspase-3, Bcl-2, PCNA e AMH, foram imprescindíveis para determinar a análise da dinâmica ovariana, no sentido de propiciarem dados que sugerem avaliar se folículos estão em estado de atresia ou desenvolvimento e a produção hormonal atuando no processo da foliculogênese dessas espécies.