O Repositório Institucional da Universidade Federal Rural da Amazônia (RIUFRA) é um dispositivo de armazenamento e disseminação das obras intelectuais da UFRA, produzidas no âmbito das atividades de pesquisa, ensino e extensão da instituição. É composto de documentos em formato digital, provenientes das atividades desenvolvidas pelo corpo docente, discente e técnico-administrativo da UFRA e por obras elaboradas a partir de convênio ou colaboração entre a instituição e outros órgãos publicados em autoria e/ou coautoria.
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http://repositorio.ufra.edu.br/jspui/handle/123456789/746| Title: | Análise do perfil de metilação e expressão do gene COX-2 em Sapajus apella como modelo experimenta para adenocarcinoma gástrico. |
| Advisor: | BORGES, Bárbara do Nascimento |
| Authors: | PINHEIRO, Danilo do Rosário |
| Keywords: | Macaco-prego Adenocarcinoma gástrico PTGS2 Metilação Imunohistoquímica Adenocarcinoma gástrico Sapajus apella - Carcinogênese Câncer Gástrico |
| Issue Date: | 2014 |
| Publisher: | UFRA |
| Citation: | PINHEIRO, Danilo do Rosário. Análise do perfil de metilação e expressão do gene COX-2 em Sapajus apella como modelo experimenta para adenocarcinoma gástrico. Orientadora: Bárbara do Nascimento Borges. 2014. 89 f. Dissertação (Mestrado em Saúde e Produção Animal na Amazônia) - Universidade Federal Rural da Amazônia, Belém, 2014. Disponível em: http://repositorio.ufra.edu.br/jspui/handle/123456789/746. Acesso em: . |
| Resumo: | O adenocarcinoma gástrico continua a ser um fardo mundial como uma das principais causas de morte relacionada ao câncer. Existem duas formas de adenocarcinoma gástrico: a do tipo difuso e a do intestinal, sendo esta última caracterizada através de uma série de passos seqüenciais. Uma das enzimas mais alteradas durante esta progressão é a COX-2 que está presente em tumores e lesões pré-neoplásicas, sendo que vários estudos sugeriram que esta pode ser um fator importante na carcinogênese gástrica. Com o objetivo de estudar o padrão de metilação e de expressão de COX-2 durante os estágios de desenvolvimento do adenocarcinoma gástrico do tipo intestinal, foram utilizados seis animais da espécie Sapajus apella, induzidos à carcinogênese gástrica pelo uso de N-metil-N-nitrosurea (MNU), um potente agente mutagênico pertence à classe das nitrosamidas. A seqüência da região promotora do gene COX-2 de S. apella foi obtida usando iniciadores desenhados a partir das seqüências de Homo sapiens e Saimiri boliviensis, e utilizada para a identificação de sítios de ligação de fatores de transcrição e de elementos cis-regulatórios. A análise de metilação foi realizada pela técnica de PCR Metilação Específica (MSP) e a expressão analisada por Imunohistoquímica (IHQ). Foram obtidas 20 amostras, sendo que dos seis animais induzidos, apenas um desenvolveu tumor, enquanto os demais vieram a óbito ainda com lesões pré-neoplásicas. Foi obtido um fragmento de 675 pb do promotor de COX-2 de S. apella, e este apresentou uma similaridade de 99,2% e 68,2% com H. sapiens e S. boliviensis, respectivamente, sugerindo que S. apella pode ser considerado um modelo mais adequado que Saimiri para o estudo da carcinogênese comparada. Foram identificados diversos sítios de ligação para fatores de transcrição (CdxA, GATA-1 e GATA-2), bem como elementos cis-regulatórios, (P53RE, NF-Y e STAT), idênticos aos descritos para humanos. A análise de MSP revelou que todas as amostras analisadas (tecido normal, lesões pré-neoplásicas e tecido tumoral) apresentaram-se metiladas para o gene estudado. Já o teste de IHQ revelou que amostras normais foram as únicas que não apresentaram a expressão do gene, sugerindo que a região analisada em S. apella, não representa uma região chave na expressão de COX-2, fazendo-se necessários estudos mais aprofundados acerca da regulação transcricional desse gene. |
| Abstract: | Gastric câncer (GC) remains one of the main causes of death by câncer in the world. There are two hystological types of GC: Diffuse and Intestinal, and the latter is characterized by the presence of pre-neoplastic lesions. One of the most altered enzymes during the Intestinal GC pathway is COX-2, considered an important marker of this type of lesion. This work aims to study the methylation and expression pattern of COX-2 during the Intestinal GC pathway in six animais of Sapajus apella, induced by N-methyl-N-Nitrosurea (MNU). The promoter sequence of S. apella COX-2 gene was obtained using primers designed from conserved regions of Homo sapiens and Saimiri boliviensis, and used for the Identification of transcription factors and cis-regulatory elements binding sites. Methylation pattern was assessed using Methylation Specific PCR (MSP) technique and the expression was analyzed by Immunohistochemistry (IHQ). A total of 20 samples were obtained, and from the six initially induced animais, only one developed gastric tumor. A fragment of 675 pb from the promoter region of S. apella COX-2 was obtained and this sequence was 99.2% and 68.2% similar with H. sapiens and S. boliviensis, suggesting that S. apella may be considered a more appropriate animal model than Saimiri for the comparative oncology study. Similar to humans, several binding sites for transcription factors (CdxA, GATA-1 and GATA-2), and cis-regulatory elements (P53RE, NF-Y and STAT), were identified in S. apella sequence. MSP revealed that ali studied samples (normal, pre-neoplastic and tumoral) were methylated. On the other hand, IHQ results pinpointed to a positive expression of COX-2 in ali pre-neoplastic and tumoral samples, suggesting that the analyzed fragment may not represent a core region in the COX-2 regulation in GC of S. apella. Our results suggest the needed of more studies about the transcriptional regulation of this gene in GC. |
| URI: | http://repositorio.ufra.edu.br/jspui/handle/123456789/746 |
| Appears in Collections: | Dissertações - Saúde e Produção Animal na Amazônia (Belém) |
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